MOIS HT – Imageamento in Vivo por Bioluminescência e Fluorescência

MOIS HT – Imageamento in Vivo por Bioluminescência e Fluorescência

Sistema de imageamento in vivo para bioluminescência e fluorescência, permitindo a análise de sinais em tecidos e organismos in vivo e in vitro.

Imageamento in Vivo por Bioluminescência e Fluorescência

O MOIS HT da RWD Life Science é um sistema avançado de geração de imagens projetado para a análise in vivo e in vitro de sinais bioluminescentes e fluorescentes em tecidos e organismos, dando suporte a aplicações de pesquisa como o monitoramento do crescimento de tumores e o rastreamento de células-tronco/células imunológicas.

Com um CCD de alta sensibilidade com 90% de eficiência quântica e resfriamento a -90°C, o sistema oferece desempenho excepcional em imagens de bioluminescência. Equipado com uma câmera macro otimizada e uma variedade de filtros de imagem profissionais, o MOIS HT permite a aquisição rápida e intuitiva de imagens e vídeos de alta qualidade em tempo real.

Com 26 filtros de banda estreita e tecnologia avançada de não mistura espectral, esse gerador de imagens aumenta a precisão e a resolução das imagens de fluorescência, abrangendo um amplo espectro de corantes fluorescentes usados em pesquisas biológicas. O software dedicado (incluído) simplifica a análise de imagens luminescentes.

O MOIS HT combina um design simples de fácil utilização com velocidade e confiabilidade, tornando-o uma solução eficiente para pesquisadores.

Visão geral

O sistema imageamento in vivo por bioluminescência e fluorescência para pequenos animais MOIS HT é uma plataforma de aquisição de imagens não invasiva projetada para monitoramento e visualização em tempo real de processos biológicos em pequenos animais vivos, como camundongos e ratos. Com suporte para os modos de geração de imagens de bioluminescência e fluorescência, esse sistema permite que os pesquisadores rastreiem as atividades moleculares e celulares em organismos vivos, fornecendo informações essenciais sobre a progressão da doença, a eficácia do tratamento e os mecanismos biológicos fundamentais, sem a necessidade de eutanásia do animal.

Principais aplicações do MOIS HT

  • Imagens de bioluminescência/fluorescência in vivo e in vitro;
  • Expressão gênica animal/planta, biologia do desenvolvimento;
  • Pesquisa de imunidade e desenvolvimento de medicamentos;
  • Monitoramento do desenvolvimento de tumores/rastreamento da migração celular;
  • Biologia molecular e nanopartículas.
  • Neurociência.

Principais recursos do MOIS HT

Alta precisão

  • Utiliza uma câmera científica CCD com iluminação traseira e resfriamento profundo de -90°C para reduzir efetivamente o ruído de fundo.
  • Câmera CCD com resolução >1024x1024, eficiência quântica >90%, e revestimento especial do chip que oferece alta sensibilidade na faixa de 500-700 nm (até 900 nm para aplicações mais amplas com corantes padrão).
  • Uma lente de foco fixo (F/Stop ≤ 0,9) captura mais fótons por unidade de tempo, registrando detalhes mais finos e reduzindo o ruído.
  • O equipamento padrão inclui 19 filtros de excitação e 7 filtros de emissão de banda estreita, fornecendo um sinal limpo para evitar interferência entre cores e produzir dados realistas.
  • Plataforma aquecida para animais (20-42°C);
  • A uniformidade da intensidade da luz de excitação garante potência constante em diferentes campos de visão, aumentando a confiabilidade da coleta de dados de fluorescência.
  • O instrumento é calibrado conforme os padrões NIST para quantificação absoluta de bioluminescência, assegurando resultados consistentes em todas as configurações de imagem.

Resultados quantitativos excelentes

  • O software de imagem/análise possui vários modos de seleção de contorno de ROI (Região de Interesse) para análise quantitativa de sinais.
  • O software de imagem inclui um módulo de aquisição de imagens e análise de dados capaz de gerar séries temporais de imagens de bioluminescência e fluorescência multicanal, permitindo imageamento sequencial em modo múltiplo.
  • O software de imagem possui uma função de alerta em tempo real para superexposição.
  • O software de análise offline pode ser instalado um número ilimitado de vezes.
  • A quantidade de fótons emitidos por unidade de tempo, por unidade de área e por unidade de radiano é adotada como unidade quantitativa, seguindo um padrão internacionalmente reconhecido.
  • O sistema é equipado com um laser indicador que exibe o centro do campo de visão em tempo real.

Capacidade de Expansão

Sistema compatível com futura instalação de módulo de raios X.

Multifuncionalidade

O sistema utiliza quatro canais (azul, verde, vermelho e infravermelho próximo), permitindo a visualização da maioria das proteínas fluorescentes e materiais luminescentes, desde GFP até ICG. Como mais de uma substância fluorescente pode ser imageada, é possível observar diferentes características em uma única amostra.

Por exemplo, em um mesmo animal, podem ser realizados imageamentos de tumores e de fármacos simultaneamente, permitindo a observação conjunta do direcionamento do fármaco e da formação tumoral. Além disso, imagens em modo brilho podem ser combinadas para localizar com precisão a fluorescência no animal.

Aplicação do MOIS HT

Monitoramento do desenvolvimento de tumores e infecções

Linhas celulares estáveis com GFP podem ser utilizadas para confirmar o desenvolvimento de tumores. As linhagens celulares estáveis com GFP geradas podem ser visualizadas in vitro usando o sistema MOIS HT. As células GFP são injetadas no tecido subcutâneo, e imagens fluorescentes são geradas à medida que as células proliferam. Dessa forma, não apenas o tamanho do tumor pode ser quantificado e comparado, mas também é possível obter imagens de metástases em outros tecidos.

A intensidade do sinal fluorescente muda ao longo do tempo, e o tempo de exposição da câmera é ajustado de acordo. O software de análise pode quantificar essas alterações, levando em consideração diferentes condições, como tempo de exposição e ganho. Além disso, os resultados de amostras com imagens diferentes também podem ser comparados e analisados.

Rastreamento da migração celular

Células-tronco ou células imunológicas com funções ampliadas para diversos fins podem ser visualizadas em animais para determinar sua localização e viabilidade. Células-tronco e imunológicas são difíceis de marcar com genes fluorescentes. Por isso, essas células podem ser coradas com reagentes fluorescentes de diferentes maneiras.

Células-tronco e imunológicas marcadas com corantes fluorescentes podem ser administradas em animais por vários métodos, como injeção intravenosa, intraperitoneal ou subcutânea. O sistema de imageamento MOIS HT pode ser utilizado para determinar a localização dessas células. Além disso, análises quantitativas permitem avaliar a viabilidade celular ao longo do tempo.

Visualização de Plantas

O imageamento de plantas com o MOIS HT permite a aquisição de folhas marcadas com GFP. No entanto, a obtenção de imagens de folhas é desafiadora devido à forte autofluorescência da clorofila. Esse problema pode ser contornado com o uso de filtros especiais que eliminam a autofluorescência, permitindo a análise específica do sinal GFP.

Além disso, a autofluorescência da clorofila pode ser utilizada como dados valiosos, pois a intensidade do sinal está diretamente relacionada ao grau de atividade fotossintética. O sistema também permite a captação de imagens de sementes e calos vegetais. Dessa forma, é possível realizar o acompanhamento por fluorescência em todo o ciclo de vida da planta, desde a germinação até a maturidade.

Monitoramento da Biodistribuição de Fármacos, Moléculas e Nanopartículas

Fármacos testados in vitro podem ser administrados em animais para fins experimentais. Ao capturar imagens em intervalos temporais definidos, é possível estudar os padrões de distribuição e acúmulo do medicamento nos tecidos do organismo vivo.

Imagens dos fármacos confirmadas in vivo podem ser reavaliadas in vitro. Como a fluorescência persiste mesmo após a eutanásia do animal, cada tecido pode ser analisado individualmente. Os dados obtidos in vitro, em conjunto com os resultados in vivo, fornecem uma excelente validação experimental, permitindo uma análise abrangente da farmacocinética e dinâmica de distribuição.

Exemplos de imagens de animais in vivo

a. Tumores expressando GFP derivados de linhagens celulares estáveis após injeção subcutânea
Tumores fluorescentes são gerados a partir de linhagens celulares transfectadas com GFP e implantados via injeção subcutânea em modelos animais para monitoramento.

b. Utilização de GFP e ICG para imageamento por fluorescência
A combinação de proteína verde fluorescente (GFP) e verde de indocianina (ICG) permite imageamento multimodal em diferentes espectros de fluorescência.

c. Aplicação do gene iRFP para imageamento de tumores em infravermelho próximo (NIR)
O gene de proteína fluorescente no infravermelho (iRFP) possibilita a visualização de neoplasias através de imageamento por fluorescência no espectro NIR.

d. Migração de células imunológicas marcadas com DiD da veia caudal para o canal espinhal
Células do sistema imune marcadas com o corante lipofílico DiD são rastreadas durante seu deslocamento da circulação periférica para o sistema nervoso central.

e. Acúmulo de fármaco marcado com LCG no tecido pulmonar
A distribuição pulmonar de compostos farmacológicos é monitorada através de marcagem com corantes fluorescentes lipofílicos (LCG).

f. Migração de fármaco marcado com Cy7 para o fígado
O traçamento de moléculas terapêuticas conjugadas com cianina 7 (Cy7) permite avaliar sua captação hepática.

Examples of visualization of fluorescence of different objects of study

a. Rotulagem fluorescente de peixe-zebra (Danio rerio)
Marcação por fluorescência em embriões ou organismos adultos de zebrafish para estudos de desenvolvimento ou genética.

b. Visualização de células expressando GFP em placas de 24 poços
Monitoramento in vitro de culturas celulares geneticamente modificadas para expressar Proteína Verde Fluorescente (GFP) em sistemas de microplacas.

c. Teste de marcadores fluorescentes
Avaliação de diferentes compostos fluoróforos para aplicações em bioimageamento e ensaios celulares.

d. Estudos de distribuição de fármacos in vitro
Análise da dispersão espacial de compostos terapêuticos em modelos celulares ou de tecido.

e. Sinal GFP para estudo da expressão gênica de patógenos foliares usando vetores virais
Detecção da infecção e propagação de patógenos vegetais através de sistemas de expressão com GFP mediados por vetores virais.

f. Fluorescência da clorofila
Análise da atividade fotossintética e saúde vegetal através da emissão fluorescente natural dos cloroplastos.

g. Expressão de genes marcadores em folhas de plantas
Detecção de genes reporter (como GFP) em tecidos foliares para estudos de expressão gênica e transformação genética.

h. Isolamento de sementes com genoma transfectado usando visualização por GFP
Seleção de sementes geneticamente modificadas através da detecção da fluorescência GFP como marcador de transformação bem-sucedida.

Parâmetros Técnicos

Modos de Imagem

Módulo de Imagem de Fluorescência
Módulo de Imagem de Bioluminescência
Imagem com Separação Espectral
Módulo de Raio-X Upgrade extensível
Módulo de Imagem de Fluorescência por Upconversão Upgrade extensível

Detector

Tipo de Câmera CCD científico de silício back-thinned
Temperatura de Operação da Câmera Resfriamento absoluto a -90℃
Dimensões do Pixel 1024×1024
Abertura da Lente F/stop ≤ 0,95
Campo de Visão Mínimo (minFOV) 2,5cm × 2,5cm
Campo de Visão Máximo (maxFOV) 25cm × 25cm
Eficiência Quântica ≥90% (500-700nm)

Laser e Componentes Relacionados

Fonte de Luz Lâmpada halógena de 150W
Laser Indicador Visualização em tempo real para auxílio de posicionamento central

Filtros

Filtros de Excitação 19 filtros
Filtros de Emissão 7 filtros

Software

Sistema de Aquisição Online • Suporta alertas de superexposição.
• Possui funções internas de séries temporais, multicanal e multimodo.
• Permite aquisição e análise de dados sincronizadas.
Estação de Análise Offline • Suporta análise offline com módulo integrado.
• Sem limite de instalações do software de análise offline.

Controle Ambiental

Câmara para Animais Padrão 5 canais, opcional upgrade para 10 canais
Módulo de Temperatura 20 - 40℃ (±0,1℃)
Módulo de Administração de Fármacos • Permite adição de fármacos durante o experimento
• Suporta dosagem automática em múltiplos pontos
Sistema de Anestesia • Anestésico: Isoflurano
• Concentração ajustável de 0-5%

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Catálogo

A Biolink é representante da RWD Life Science no Brasil e América do Sul

Unidade de controle de temperatura

A unidade de controle de temperatura facilita a regulação da temperatura interna na área de experimentos: Aquecimento e Resfriamento. Não é obrigatório, mas é adequado para manter seus peixes aquecidos para experimentos de longo prazo.

  • A temperatura pode ser controlada de 10 °C a 40 °C
  • Mantenha uma temperatura constante durante todo o experimento
  • Ajuste da temperatura de 7°C em 10 minutos no máximo
  • Choques térmicos disponíveis (opção de software) para protocolo de preferência de local térmico
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